長臂生物素標記試劑盒

使用說明書

僅供體外研究使用，不用于臨床診斷!

第1版（2016年04月修訂）

關聯信息

生物素和親和素系統作為最為常見的的信號放大系統，在生化檢測中被廣泛使用。為解決由于空間位阻效應產生的生物素和親和素難以結合和結合效率低等問題，武漢云克隆研發了帶有NH2-長臂的生物素標記試劑盒，一方面它保留了原有生物素特性，另一方面它減小了空間位阻，使生物素和親和素的結合效率更高。

試劑盒包含過濾管和相關的試劑，滿足6次0.1-1mg 的蛋白或抗體的標記，標記過程不需透析，操作簡便。

試劑盒組分

組分	規格
試劑A	30 ml
試劑B	1 ml
試劑C	100ul
NH2-長臂生物素	6管
過濾管	2ml*6管
說明書	1儲存及有效期

2-8℃，試劑盒質保期一年。

操作步驟

1、將待生物素化的蛋白質或抗體和試劑A按v:v=1~2共計2ml加入過濾管內管中，7500g離心10分鐘，棄去外管內液體。利用試劑A補足2ml，7500g離心10分鐘， 收集過濾管內管中液體。

2、用試劑A將樣品濃縮液稀釋到1mg/ml（如果濃縮液濃度過低需要進一步濃縮），再吸取1ml 稀釋好的樣本放入過濾管內管中。

3、向裝有NH2-長臂生物素的EP管中加入150ul 的試劑B，使管內粉末充分溶解。 取120ul混合液加入到過濾管內管中，充分混勻。

4、室溫持續震蕩混勻3-4小時。

5、加入9.6ul的試劑C，室溫持續震蕩混勻10分鐘。

6、7500g離心10分鐘，棄去外管內液體，收集內管中的液體用于后續實驗。

注意事項

1、過濾管允許分子量≤10KDa的分子通過，所以請注意被標記物的分子量。

2、本試劑盒還可以用于分子量適中，能與-NH2進行反應的其他物質。

3、當NH2-長臂生物素與活性蛋白的活性中心部位以及活性中心區域的氨基酸結合可能導致蛋白失活，對于此種蛋白請務必更換其他方式進行標記。

4、NH2-長臂生物素在溶解前請離心，防止粉末吸附在管壁和管蓋上。

5、被標記物量比較少的情況下，為減少樣本的損失，建議使用透析的方法。