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腫瘤蛋白p53(P53)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)

CLIA Kit for Tumor Protein p53 (P53)

TP53; LFS1; TRP53; Li-Fraumeni Syndrome; Cellular tumor antigen p53; Antigen NY-CO-13; Phosphoprotein p53; Tumor suppressor p53

  • 腫瘤蛋白p53(P53)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) 產品包裝(模擬)
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  • 腫瘤蛋白p53(P53)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) 實驗結果圖
  • SCA928Hu.jpg 標準曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測腫瘤蛋白p53(P53),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的腫瘤蛋白p53(P53)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 90-104 93
EDTA plasma(n=5) 96-105 101
heparin plasma(n=5) 90-102 94

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的腫瘤蛋白p53(P53),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中腫瘤蛋白p53(P53)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 80-92% 83-102% 85-99% 80-98%
EDTA plasma(n=5) 96-104% 86-101% 86-102% 78-93%
heparin plasma(n=5) 90-97% 91-98% 88-99% 93-101%

穩定性

經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加底物100µL,37°C孵育10分鐘;
8. 讀數。

實驗原理

將腫瘤蛋白p53(P53)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的腫瘤蛋白p53(P53)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的腫瘤蛋白p53(P53)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入底物。加入底物后會產生輝光型光信號。發射光強度和樣品中的腫瘤蛋白p53(P53)呈正相關。用化學發光儀測定相對光單位(RLU),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志 參考文獻
Anticancer Research Analysis of p53 and miRNA expression after irradiation of glioblastoma cell lines [PubMed: 23155233]
Microscopy Research and Technique Therapeutic role of curcumin in oxidative DNA damage caused by formaldehyde [PubMed: 25761397]
J Nutr Biochem Supplementation with Selenium yeast on the prooxidant–antioxidant activities and anti-tumor effects in breast tumor xenograft-bearing mice [PubMed: 26344777]
Biochemical and Biophysical Research Communications Transcription factor HBP1: A regulator of senescence and apoptosis of preadipocytes [Pubmed: 31331641]
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