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維生素D結合蛋白(DBP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法)

CLIA Kit for Vitamin D Binding Protein (DBP)

GC; VDBG; VDBP; Group-Specific Component; Gc-globulin

  • 維生素D結合蛋白(DBP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) 產品包裝(模擬)
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  • 維生素D結合蛋白(DBP)檢測試劑盒(化學發光免疫分析法) 實驗結果圖
  • SCB810Hu.jpg 標準曲線圖
  • Certificate 通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證

特異性

本試劑盒用于檢測維生素D結合蛋白(DBP),經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測,因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。

回收率

分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的維生素D結合蛋白(DBP)(加標樣品),重復測定并計算其均值,回收率為測定值與理論值的比率。

樣本 回收率范圍(%) 平均回收率(%)
serum(n=5) 88-97 94
EDTA plasma(n=5) 80-90 83
heparin plasma(n=5) 91-104 101

精密度

精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10%
批間差: CV<12%

線性

在定值血清及血漿樣本內加入適量的維生素D結合蛋白(DBP),并倍比稀釋成1:2,1:4,1:8,1:16的待測樣本,線性范圍即為稀釋后樣本中維生素D結合蛋白(DBP)含量的測定值與理論值的比率。

樣本 1:2 1:4 1:8 1:16
serum(n=5) 93-101% 86-103% 80-91% 82-103%
EDTA plasma(n=5) 93-101% 82-103% 82-91% 97-105%
heparin plasma(n=5) 87-96% 95-105% 98-105% 79-104%

穩定性

經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。

實驗流程

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100μL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加底物100µL,37°C孵育10分鐘;
8. 讀數。

實驗原理

將維生素D結合蛋白(DBP)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的維生素D結合蛋白(DBP)與連接于固相載體上的抗體結合,然后加入生物素化的維生素D結合蛋白(DBP)抗體,將未結合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次徹底洗滌后加入底物。加入底物后會產生輝光型光信號。發射光強度和樣品中的維生素D結合蛋白(DBP)呈正相關。用化學發光儀測定相對光單位(RLU),計算樣品濃度。

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參考文獻

雜志 參考文獻
Proteome Science Isotope Coded Protein Labeling analysis of plasma specimens from acute severe dengue fever patients [PubMed: 23101585]
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Endocrine Vitamin D-binding protein and free vitamin D concentrations in acromegaly [PubMed: 26547217]
Proteomics Clinical Applications Comparative mass spectrometric and immunoassay‐based proteome analysis in serum of Duchenne muscular dystrophy patients [Pubmed:26680509]
PLoS One. 25-Hydroxivitamin D Serum Concentration, Not Free and Bioavailable Vitamin D, Is Associated with Disease Activity in Systemic Lupus Erythematosus Patients. [pubmed:28085957]
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J Clin Res Pediatr Endocrinol Is Bioavailable Vitamin D Better Than Total Vitamin D to Evaluate Vitamin D Status in Obese Children? [34013709]
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