酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)
Mini Samples ELISA Kit for Acid Sphingomyelinase (ASM)
SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase
- 編號MEB360Hu
- 物種Homo sapiens (Human，人) 相同的名稱，不同的物種。
- 實驗方法雙抗夾心
- 反應時長3h
- 檢測范圍0.156-10ng/mL
- 靈敏度最小可檢測劑量小于等于0.058ng/mL.
- 樣本類型serum, plasma, tissue homogenates and other biological fluids
- 下載 英文說明書 中文說明書
- 規格 48T96T 96T*5 96T*10 96T*100
- 價格 ¥ 3352 ¥ 4788 ¥ 21546 ¥ 40698 ¥ 335160
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產品包裝(模擬)
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產品包裝(模擬)
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實驗結果圖
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標準曲線圖
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通過ISO 9001、ISO 13485質量體系認證
特異性
本試劑盒用于檢測酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)，經檢測與其它相似物質無明顯交叉反應。
由于受到技術及樣本來源的限制，不可能完成對所有相關或相似物質交叉反應檢測，因此本試劑盒有可能與未經檢測的其它物質有交叉反應。
回收率
分別于定值血清及血漿樣本中加入一定量的酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)（加標樣品），重復測定并計算其均值，回收率為測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 回收率范圍(%) | 平均回收率(%) |
| serum(n=5) | 78-88 | 85 |
| EDTA plasma(n=5) | 89-97 | 94 |
| heparin plasma(n=5) | 98-105 | 101 |
精密度
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批內差：取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續測定20 次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差：選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定，每個樣本使用同一試劑盒重復測定8次，分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差： CV<10%
批間差： CV<12%
線性
在定值血清及血漿樣本內加入適量的酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)，并倍比稀釋成1:2，1:4，1:8，1:16的待測樣本，線性范圍即為稀釋后樣本中酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)含量的測定值與理論值的比率。
| 樣本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| serum(n=5) | 78-101% | 84-102% | 86-94% | 78-99% |
| EDTA plasma(n=5) | 87-105% | 86-101% | 88-96% | 95-103% |
| heparin plasma(n=5) | 83-93% | 82-92% | 93-101% | 80-89% |
穩定性
經測定，試劑盒在有效期內按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
實驗流程
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）25µL，37°C溫育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A25µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B25µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物25µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液20µL，立即450nm讀數。
實驗原理
將酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)與連接于固相載體上的抗體結合，然后加入生物素化的酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)抗體，將未結合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的酸性神經鞘磷脂酶(ASM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法,小樣本)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值)，計算樣品濃度。
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參考文獻
| 雜志 | 參考文獻 |
| Blood.? | Acid sphingomyelinase is activated in sickle cell erythrocytes and contributes to inflammatory microparticle generation in SCD [Pubmed:25075126] |
| Journal of Clinical Lipidology | Increase in acid sphingomyelinase level in human retinal endothelial cells and CD34+ circulating angiogenic cells isolated from diabetic individuals is associated with dysfunctional retinal vasculature and vascular repair process in diabetes [10.1016/j.jacl.2017.03.007] |
| Diabetes & metabolism | Fenofibrate decreases plasma ceramide in type 2 diabetes patients: A novel marker of CVD? [pubmed:28499696] |
| INFLAMMATION | Acid Sphingomyelinase and Acid |?-Glucosidase 1 Exert Opposite Effects on Interleukin-1|?-Induced Interleukin 6 Production in Rheumatoid Arthritis Fibroblast-Like Synoviocytes [33665756] |
| Indian J Ophthalmol | Evaluation of sphingolipid metabolism on diabetic retinopathy [34708809] |
